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    母乳低聚糖的前生今世之-检验检测篇

    发布日期:2025-03-07

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    作者:高培钧 中国蓝狮平台标准化检验检测专业委员会副秘书长

    新来特商务咨询(上海)有限公司 

    徐红斌 中国蓝狮平台标准化检验检测专业委员会副主任委员

    上海市质量监督检验技术研究院 


    母乳是新生儿最理想的食物来源,蕴含着众多对婴儿生长发育至关重要的成分。母乳低聚糖(Human Milk Oligosaccharides,HMO)便是其中一类备受关注的物质,其在母乳中的含量仅次于乳糖和脂肪,是第三大类固体物质。虽然不易被人体肠道消化吸收,但近年来大量研究发现,其对婴儿发育有着不可或缺的作用,能刺激新生儿肠道里的那些益生菌,平衡肠道菌群,能平衡婴儿的免疫系统。今天,就让我们一同揭开母乳低聚糖检测方法的神秘面纱。


    一、母乳低聚糖的特性与检测难点


    母乳低聚糖是由半乳糖、葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖、岩藻糖和唾液酸等基础单糖组成的短链聚合物,其结构多样,存在大量同分异构体。从组成结构来看可能有上千种,目前分离出来的有200种左右,确定结构和名称的只有157种。再加上母乳低聚糖没有内在的发色基团,这使得它们在检测过程中难以被直接识别和定量分析,给检测工作带来了不小的挑战。


    二、常见的母乳低聚糖检测方法


    1.液相色谱法


    高效液相色谱法可用于对母乳低聚糖进行定量检测和结构表征。但由于母乳低聚糖本身紫外线吸收能力较差,缺乏荧光特性,所以在使用该方法时,往往需要对其进行衍生化处理,以此来增加检测的灵敏度。常用的衍生试剂有2-氨基苯甲酰胺、2-氨基苯甲酸和2-氨基吖啶酮等。衍生化处理后还需要通过萃取或离子交换色谱等方法来去除多余的衍生试剂,避免其对后续分析造成干扰。


    2. 液相色谱-质谱联用(LC-MS)法


    液相色谱可以与能够检测结构信息的MS检测系统联用,这也是目前分析母乳低聚糖的重要手段之一。当样品通过色谱柱后,各组分之间实现分离,待分离组分到达离子源时,会将待测组分进行分子离子破碎,产生大量碎片并对其进行分析。该方法不仅可以通过峰面积对母乳低聚糖进行定量分析,还能通过质谱碎片进行结构的分析以及定性的检测,同时大大缩短了分析时间。


    3.离子交换色谱(HPAEC)法


    离子色谱是分析阴阳离子的一种液相色谱法,而高效阴离子交换色谱法就是其中适用于母乳低聚糖检测的一种。它的原理是根据被测分析物的可解离性与固定相表面带电荷的功能基团相互作用,使待分析的物质保留在固定相上,进而实现不同离子的分离。这种方法检测准确,分析速度快,灵敏度高,而且无需对母乳低聚糖进行衍生化处理,还可以同时测定多个待分析物质的量,有效避免了因衍生化而产生的误差,特别适用于复杂母乳低聚糖混合物的定性和定量分析。


    4.毛细管电泳(CE)法


    毛细管电泳法是通过在外加电场的作用下分离样品。在检测母乳低聚糖时,首先被分离洗脱出来的是带正电荷的物质,接着是中性物质,最后是带负电的物质。不过,这种方法存在一个较为明显的问题,那就是同分异构体容易出现共同洗脱的情况,不太容易区分。但研究人员也想出了应对之策,比如可以通过使用较长的毛细管色谱柱,或者在合理的时间范围内选用不同的分离缓冲液和凝胶,以此来提高分析物各组分之间的分离度。


    三、检测方法的未来展望


    随着科技的不断进步,新的检测技术也在不断涌现。母乳低聚糖检测方法的不断发展,让我们对母乳这一神奇的天然食物有了更深入的了解。希望通过这些科学的检测方法,能让每一个宝宝都能享受到最优质的营养,健康快乐地成长。


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